ВЭЖХ-МС/МС (высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемной масс-спектрометрией).
Исследуемый материал: Сыворотка крови
Синонимы: Эргокальциферол и холекальциферол; Витамины D2 и D3; D2 и D3; 25-OH D2 и 25-ОН D3.
Ergocalciferol (D2) and cholecalciferol (D3); Vitamins D2 and D3; D2 and D3; 25-OH D2 and 25-ОН D3.
Краткая характеристика определяемых веществ (Витамины D2 и D3)
Витамин D и его метаболиты можно разделить на группу холекальциферола (витамина D3) и группу эргокальциферола (витамина D2). Обозначение D без указания цифровых индексов подразумевает суммарно D2 и D3. Холекальциферол (D3) синтезируется в организме человека эндогенно – в коже из 7-дегидрохолестерола при воздействии ультрафиолета солнечного света. Часть витамина D3 может поступать с пищей животного происхождения. Эргокальциферол (D2) поступает в организм только с пищей, образуется из эргостерола, стероида растительного происхождения, под действием ультрафиолетового облучения. Только некоторые виды пищи являются естественными источниками витамина D (в том числе, жирные сорта рыбы, жир печени рыб, меньше – яичный желток, сыр, говяжья печень), хотя в настоящее время молочные или зерновые продукты могут быть искусственно обогащены этим витамином. Основным источником витамина D в организме человека в обычных условиях является витамин D3 (80-90%).
Метаболическое преобразование исходно неактивных нативных форм витамина D3 и D2 в форму 25-OH-D (25-OH-D3 и 25-OH-D2) происходит преимущественно в печени. 25-OH-D обладает умеренной биологической активностью, в крови переносится в комплексе с транспортным белком, может депонироваться в жировой ткани. Это основной метаболит витамина D, присутствующий в крови. Часть 25-OH-D подвергается следующему гидроксилированию в почках с образованием биологически наиболее активной формы витамина – 1,25(OH)D. Содержание в крови 25-OH-D (суммарно 25-OH-D3 и 25-OH-D2) служит лучшим индикатором статуса витамина D в организме (см. также тест № 928 Витамин 25-ОН-D).
С какой целью определяют уровень витаминов D2 и D3 в сыворотке крови
Раздельное определение холекальциферола (витамина D3, 25-OH-D3) и эргокальциферола (витамина D2, 25-OH-D2) позволяет отразить вклад каждой из данных фракций.
Определение уровня 25-OH-D3 и 25-OH-D2 может быть полезно при мониторинге лечения препаратами витамина D, а также для обследования пациентов, не отвечающих на терапию.
Особенности применения теста «Витамины D2 и D3 раздельное определение ВЭЖХ-МС/МС, сыворотка»
Интерпретация результатов исследования 25-OH-D проводится на основе суммарного показателя, но раздельное определение 25-OH-D3 и 25-OH-D2 позволяет при этом отразить вклад каждой из фракций. В лечении дефицита витамина D могут использовать препараты нативных витаминов D3 или D2. Контроль лечения обычно проводят по данным клинического обследования и лабораторным показателям, отражающим состояние кальций-фосфорного обмена. Если пациент не отвечает улучшением на добавки витамина (что может быть связано с несоблюдением предписаний врача, нарушениями всасывания в желудочно-кишечном тракте, изменениями метаболизма, резистентностью и пр.) – для оценки ситуации может быть полезно дополнительное определение уровня отдельных метаболитов 25-OH-D3 и 25-OH-D2. Такую возможность обеспечивает применение метода на основе тандемной масс-спектрометрии.
Внимание! Для начальной оценки статуса витамина D предпочтителен тест № 928 Витамин 25-ОН-D (стандартизован по NIST SRM 2972)
Литература
Основная литература:
Клиническое руководство Тица по лабораторным тестам (4-е изд.), М., Лабора, 2013, 1280 с.
Национальная программа «Недостаточность витамина D у детей и подростков Российский Федерации: современные подходы и коррекция. / Союз педиатров [и др.,], Москва, ПедиатрЪ, 2018, 96 с.
Пигарова Е.А. и др. Клинические рекомендации Российской ассоциации эндокринологов по диагностике, лечению и профилактике дефицита витамина D у взрослых. Проблемы эндокринологии, 2016, №4, с.60-84.
Ferrari D. et al. Concerning the vitamin D reference range: pre-analytical and analytical variability of vitamin D measurement. Biochem Med (Zagreb) 2017; 27, 3, 030501.
Garg U. 25-Hydroxyvitamin D Testing Immunoassays Versus Tandem Mass Spectrometry. Clin. Lab. Med., 2018, https://doi.org/10.1016/j.cll.2018.05.007
Munns C.F. et al. Global Consensus Recommendations on Prevention and Management of Nutritional Rickets. J Clin Endocrinol Metab. 2016, 101, 2, pp. 394–415.
Правила подготовки к исследованию на определение уровня витаминов D2 и D3 в сыворотке крови
Специальной подготовки не требуется. Следовать указаниям лечащего врача относительно условий тестирования. После применения витамина D в дозировке более 7000 МЕ/сутки определение 25(OH)D целесообразно проводить не ранее, чем через три дня с момента последнего приема подобных дозировок препарата, если иное не предписано лечащим врачом.
Детям до 1 года проводить исследование 25-OH-D методом ВЭЖХ-МС/МС не рекомендовано, следует применять тест № 928 Витамин 25-OH-D.
В каких случаях проводят анализ крови на определение уровня витаминов D2 и D3
В мониторинге лечения препаратами витамина D для обследования пациентов, не отвечающих на терапию.