Волчаночный антикоагулянт
Метод определения: Исследование с использованием разведённого яда гадюки Рассела (dRVTT), скрининговый и подтверждающий тест. Автоматический анализатор свертывания.
Исследуемый материал: Плазма (цитрат)
Синонимы: Аутоантитела (IgG) против фосфолипидов;
Lupus anticoagulant panel; Lupus inhibitor; LA sensitive PTT; PTT-LA; Dilute Russell viper venom test; DRVVT; Modified Russell viper venom tes; MRVVT.
Краткая характеристика теста «Волчаночный антикоагулянт»
Волчаночный антикоагулянт (ВА) – собирательное название для популяции антифосфолипидных антител, которые вызывают удлинение времени свертывания в фосфолипид-зависимых коагуляционных тестах. Происхождение названия «волчаночный антикоагулянт» исторически связано с тем, что впервые этот феномен был описан при обследовании пациента с системной красной волчанкой (СКВ). Парадоксально, в отличие от антикоагулянтного эффекта и удлинения времени свертывания в лабораторных тестах (in vitro), присутствие волчаночного антикоагулянта в условиях организма (in vivo) ассоциировано с риском состояний гиперкоагуляции и тромбозов.
В соответствии с текущими представлениями антифосфолипидные антитела представляют собой гетерогенную группу аутоиммунных антител, которые способны взаимодействовать не только с фосфолипидами, но главным образом с фосфолипид-связывающими белками и их комплексами с фосфолипидами. Наиболее часто мишенью антифосфолипидных антител при АФС является белок бета-2-гликопротеин 1. Помимо него фосфолипид-связывающими белками являются протромбин, протеин С, аннексин V, тромбомодулин, кининогены, антитромбин III и другие. Одним из важных видов фосфолипидов, с которыми связываются эти белки, является фосфатидил-серин. Механизмы патогенного действия и индукции тромбоза антифосфолипидными антителами изучены недостаточно.
Предположительно они могут включать интерференцию с эндогенными антикоагулянтами (в том числе ингибирование пути протеина С, нарушение антикоагулянтной защиты, связанной с аннексином V, ингибирование антитромбина), взаимодействие с эндотелиальными клетками, которое приводит к выделению тканевого фактора и экспрессии молекул адгезии, связывание и активацию тромбоцитов, активацию системы комплемента.
С какой целью определяют волчаночный антикоагулянт в крови
Исследование волчаночного антикоагулянта используют в диагностике антифосфолипидного синдрома (АФС). Это комплекс симптомов, который включает повторные сосудистые тромбозы или патологию беременности (чаще синдром потери плода) и характеризуется присутствием антифосфолипидных антител. Исследование включает скрининговый и, при необходимости, подтверждающий (рефлексный) тесты с разведенным ядом гадюки Рассела (dRVTT – dilute Russell viper venom time).
Исследование волчаночного антикоагулянта используют в диагностике антифосфолипидного синдрома (АФС). Это комплекс симптомов, который включает повторные сосудистые тромбозы или патологию беременности (чаще синдром потери плода) и характеризуется присутствием антифосфолипидных антител. Диагноз АФС ставится при сочетании наличия одного клинического критерия (подтвержденные эпизоды сосудистого тромбоза или определенные виды патологии беременности в анамнезе) и как минимум одного лабораторного критерия (положительный результат в любом из трех видов исследований: 1) антитела к кардиолипину; 2) волчаночный антикоагулянт; 3) антитела к бета-2-гликопротеину 1, перепроверенный по крайней мере два раза в течение 12 недель). Выявляемые в этих тестах антифосфолипидные антитела частично перекрываются по своей специфичности. Из указанных лабораторных маркеров, персистирующий ВА проявляет наиболее тесную связь с риском тромбозов при АФС. ВА может быть обусловлен присутствием антител к бета-2-гликопротеину 1 или антител к протромбину, но часто выявляется и в отсутствие таких антител.
Тест с использованием разведенного яда гадюки Рассела, который активирует непосредственно V и X факторы свертывания, независимо от активации VII, VIII, IX, XI, и XII факторов (таким образом результат не зависит от влияния их дефицита или ингибирования), является одним из рекомендуемых вариантов исследования ВА.
Скрининговый тест проводится при использовании ограниченной концентрации фосфолипидов в реагенте для повышения чувствительности к ВА. Подтверждающее исследование проводится при получении положительного результата в скрининге, тем же методом, но на фоне избытка фосфолипидов. Если удлиненное время свертывания в скрининговом тесте корректируется избытком фосфолипидов в подтверждающем тесте, это подтверждает фосфолипид-зависимый эффект и указывает на высокую вероятность присутствия ВА.
Следует учитывать, что выполнение исследования ВА на фоне терапии антикоагулянтами типа варфарина, прямых ингибиторов тромбина (Прадакса и пр.), прямых ингибиторов Xa фактора (Ксарелто и пр.) или избытка гепарина может приводить к искажению результатов (см. также раздел «Подготовка к исследованиям»).
Литература
Основная литература
- Алексеева Е.И. с соавт. Системная красная волчанка: клинические рекомендации. Часть 1. 1. Вопросы современной педиатрии. 2018; 17 (1): 19–37
- Клинические рекомендации по лечению антифосфолипидного синдрома. Ассоциация ревматологов России. М., 2013
- Кобилянская В. А. Определение волчаночного антикоагулянта у пациентов на фоне приема ривароксабана. Вестник гематологии, 2018, 15, 1, с.47-48
- Flieder T. et al. Interference of DOACs in different DRVVT assays for diagnosis of lupus anticoagulants. Thrombosis Research, 2018, 165, 101–106
- Lim W. Thrombotic Risk in the Antiphospholipid Syndrome. Semin Thromb Hemost 2014;40, pp.741–746.
- Molhoek J.E. et al The Lupus Anticoagulant Paradox. Semin Thromb Hemost. 2018, 44 (5), pp. 445-452.
- Moore G.W. Recent Guidelines and Recommendations for Laboratory Detection of Lupus Anticoagulants. Semin Thromb Hemost. 2014; 40 (2), pp. 163-171.
- Negrini S. et al. The antiphospholipid syndrome: from pathophysiology to treatment. Clin Exp Med. 2017 17 (3), pp. 257-267.
- CLSI H60-A Laboratory Testing for the Lupus Anticoagulant; Approved Guideline, 04/2014
- Материалы фирмы – производителя реагентов.
Правила подготовки к анализу крови на волчаночный антикоагулянт
Взятие крови предпочтительно проводить утром натощак, после 8-14 часов ночного периода голодания (воду пить можно), допустимо днем через 4 часа после легкого приема пищи. Накануне исследования необходимо исключить повышенные психоэмоциональные и физические нагрузки (спортивные тренировки), приём алкоголя.
Внимание! Терапия антикоагулянтами оказывает влияние на результат теста.
Чтобы избежать некорректных результатов, не рекомендуется выполнение теста на фоне острых состояний, в постоперационном периоде, на фоне антикоагулянтной терапии. Если необходимо выполнить исследование в эти периоды, рекомендуется проконсультироваться с лечащим врачом и выбрать тактику отмены или смены антикоагулянта перед проведением исследования. Пациентам, получающим антикоагулянтную терапию препаратами-антагонистами витамина К (производные кумарина, варфарин), рекомендуется отложить исследование до момента окончания терапии (по достижении уровня МНО менее 1,5). Если исследование нельзя отменить, лечащий врач может рассмотреть вариант перехода на низкомолекулярные гепарины (НМГ – фраксипарин, клексан), поскольку эти препараты оказывают меньшее влияние на результат теста. Выполнение теста необходимо проводить не менее, чем через 12 часов после последнего введения дозы НМГ.
Не рекомендуется проводить исследование на фоне лечения препаратами нефракционированного гепарина и прямыми ингибиторами Х фактора (эликвис, ксарелто) во избежание получения ложноположительных результатов. В данной ситуации также необходимо проконсультироваться с лечащим врачом о выборе тактики действий, если исследование крайне необходимо выполнить.
В каких случаях проводят анализ крови для определения волчаночного антикоагулянта
- Эпизоды ранних (до 50 лет) и особенно рецидивирующих венозных и артериальных тромбозов различной локализации, тромбоэмболий, динамических нарушений мозгового кровообращения и ишемических инсультов.
- Повторное невынашивание беременности (внутриутробная гибель плода, повторные потери плода).
- Умеренная тромбоцитопения, сочетающаяся с тромбозами.
- Обследование пациентов с системной красной волчанкой.
- Уточнение причин удлиненного АЧТВ.